| Ano: | 1998 | |||||
| Título: |
SISTEMA DE DUAS FASES AQUOSAS |
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| Palavra Chave: | Biotecnologia | Extração Líquido-Líquido em sistemas de duas fases | Xilanase | Proteínas | Separação | |
| Autor: | COSTA, Sílgia Aparecida da | |||||
| Orientador: | Adalberto Pessoa Júnior | |||||
| Banca
Examinadora: |
Adriane Maria Ferreira Milagres | Telam Teixeira Franco | ||||
| Resumo: | Neste
trabalho estudou-se a aplicação da extração
líquido-líquido na separação da xilanase produzida
pelo cultivo de Penicillium janthinellum em hidrolisado hemicelulósico
de bagaço de cana-de-açúcar, utilizando-se sistemas
de duas fases aquosas compostos por polietilenoglicol (PEG) e fosfato de
potássio.
O comportamento de coeficiente de partição (K) da xilanase em sistema de duas fases aquosas foi verificado através do estudo dos diagramas de fases, variando-se a massa molar do PEG, pH e o comprimento das linhas de amarração. Inicialmente três diferentes massas molares de PEG (300, 400 e 600) foram usadas com três valores de pH (7,8 e 9), mantendo-se as linhas de amarração constantes. O maior valor do coeficiente de partição obtido (1,43) foi para o sistema PEG600, 10% PEG, 20% de fosfato de potássio pH 7,0. Três outras massas molares de PEG (1500, 4000 e 6000) foram usadas com quatro valores diferentes de pH (5, 6, 7, 8 e 9), mantendo-se os valores das linhas de amarração aproximadamente constantes. Em todos os casos, os valores de K não foram muito superiores a 1, significando com isto que as xilanases não particionaram preferencialmente para nenhuma das fases. Um planejamento fatorial completo 25 com 4 pontos centrais foi também proposto para estudar a influência das variáveis (pH (X1), massa molar (X2) e concentração de PEG (X3), concentração do tampão fosfato (X4) e NaCI (X5) no coeficiente de partição da enzima. Através do planejamento experimental proposto foi possível selecionar as variáveis significativas para o processo de extração da enzima xilanases e das proteínas totais. O trabalho resultou em dois modelos matemáticos principais que representam os processos de extração das xilanases (1) e das proteínas totais (2). ^
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As condições ótimas
para a extração das xilanases e proteínas totais foram
obtidas pelas derivadas parciais das Equações (1) e (1) respectivamente.
O ponto ótimo para a extração das xilanases foi obtido
nas seguintes condições: pH 7,0, PEG 4000, 8,83% de PEG,
10% de fosfato de potássio e 6,02% de NaCI. O valor de K obtido
experimentalmente foi de 2,21 e o previsto pelo modelo de 2,33. A recuperação
da enzima na fase superior foi de 80% e o aumento de pureza de 1,34 vezes.
Para extração das proteínas totais as condições
otimizadas foram: pH 7,0, PEG 10000, 3,67% de PEG, 10% de fosfato de potássio
e 12,4% de NaCI. O valor de K obtido experimentalmente foi de 5,25 e o
previsto pelo modelo de 5,89.
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