Ano: 1998
Título:
AVALIAÇÃO IN VIVO DOS NÍVEIS DE ATIVIDADE DE 
INVERTASE EM LEVEDURAS
Palavra Chave: Biotecnologia Leveduras Invertase Método GOD-PAP
Autor: CARVALHO, Patrícia Maria Barroso de
Orientador: Maria Bernadete de Medeiros
Banca
Examinadora:		 Denise Maria Mano Pessoa Arnaldo Márcio Ramalho Prata
Resumo: A avaliação in vivo dos níveis de atividade de invertase (b -frutofuranosídeo frutoidrolase E.C. 3.2.1.26) é de fundamental importância no estudo do potencial de linhagens de leveduras para aplicação biotecnológica. A maior parte dos processos industriais que fazem uso dessa enzima emprega células vivas de leveduras.
Em sua maioria, os métodos descritos para a quantificação da invertase correlacionam a atividade dessa enzima com a quantidade de glicose ou açúcares redutores totais (ART) liberados após a hidrólise enzimática da sacarose em condições pré determinadas. O método da Glicose Oxidase-Peroxidase (GOD-PAP – Merck 8443) é um método colorimétrico utilizado na quantificação da glicose na faixa de concentração de 0 a 200 m g/mL.
No presente trabalho foi feita uma avaliação dos níveis de atividade de invertase em 16 linhagens de leveduras pertencentes a 9 diferentes gêneros. Dentre as linhagens testadas, 31,25% não apresentaram atividade enzimática nas condições experimentais enquanto 68,75% apresentaram atividade em níveis que variaram de 0,8 a 18 U (U=m g de ART liberados por min).
O método GOD-PAP forneceu leituras crescentes de absorbância à 510 nm, sempre que foi utilizado para determinar a concentração de glicose liberada após o ensaio enzimático. Esse resultado foi atribuído à hidrólise subsequente e contínua da sacarose por algum reagente(s) não enzimático(s) presente(s) na solução de reação do método. O estudo realizado sobre a cinética dessa reação demonstrou que o método GOD-PAP só pode ser utilizado para a determinação da concentração de glicose em presença de sacarose mediante adaptação: trabalhar com concentração inicial de glicose entre 40 a 100 m g/mL e efetuar a leitura de absorbância com o tempo de 21 min de reação.

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