| Ano: | 1999 | ||||||
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| Palavra Chave: | Biotecnologia | Basidiomicetos | Sideróforos | Hidroxamato | Catecolato | ||
| Autor: | NAPOLEÃO, Diovana Aparecida dos Santos | ||||||
| Orientador: | Adriane Maria Ferreira Milagres | ||||||
| Banca
Examinadora: |
Maricilda P. Mello | André Luis Ferraz | Norma M. Erismann | ||||
| Resumo: | Neste trabalho foi estudada a produção de sideróforos , em meio sólido e líquido, utilizando 2 cepas de decomposição parda (P. cocos e L. sulfureus), 6 cepas de decomposição branca (P. coccineus, P. medula-panis, P. pini, M. tremellosus, P. chrysosporium, T. versicolor) e um ascomiceto, T. aurantiacus. Diversas metodologias foram empregadas na detecção desses compostos complexantes de ferro. O cultivo em meio sólido foi realizado em placas contendo meio extrato de malte suplementado com o reagente CAS. Entretanto, alguns fungos cresceram pouco e outros não cresceram. Esse fato foi associado à presença do detergente HDTMA, altamente tóxico, utilizado na preparação deste meio. A fim de evitar a inibição do crescimento de fungos no meio CAS, uma adaptação desse método foi proposta utilizando placas contendo metade ágar-extrato de malte e metade de ágar-CAS, sendo as cepas fúngicas inoculadas na metade contendo ágar-extrato de malte. Quando os fungos foram inoculados nesse meio de detecção de sideróforos, foi possível observar um bom crescimento de todas as cepas e também a mudança de cor do ágar-CAS, indicando a produção de sideróforos. Em meio líquido, P. cocos, L. sulfureus e T. aurantiacus produziram as maiores reações CAS. M. tremellosus e T. versicolor não reagiram ao CAS e os demais fungos produziram uma reação CAS intermediária, porém, não alteraram a cor da reação. Essa diferença entre as reações CAS observadas em meio sólido e líquido pode ser atribuída a diferentes fatores associados à concentração de sideróforos. A partir desses resultados foram escolhidas 2 cepas fúngicas, uma pertencente à classe de decomposição parda (P. cocos) e a outra de decomposição branca (T. versicolor) para obtenção de uma fração de baixa massa molar dos extratos fúngicos e detecção de sideróforo. Nas culturas de P. cocos foi detectada a maior reação CAS e observou-se que o pH do meio reduziu de 5,5 para 2,8. A redução do pH foi atribuída à presença do ácido oxálico, o qual também reage com o CAS e intensifica a reação. T. versicolor não reagiu com o CAS, porém foi detectada a presença de compostos de baixa massa molar (< 5 Kda) com atividade oxidativa em seus extratos extracelulares. A determinação e caracterização de compostos de baixa massa molar foi realizada através dos métodos CAS, Arnow, Csáky e o método adaptado de Lowry. O extrato de P. cocos (< 5 kDa) reagiu a todos os métodos de detecção de sideróforos sugerindo a presença de sideróforos dos tipos catecolato e hidroxamato. O ultrafiltrado de T. versicolor reagiu aos métodos de Csáky e Lowry, sugerindo uma estrutura de um composto do tipo hidroxamato. | ||||||